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川陳皮素含量測(cè)定方法
來(lái)源: | 作者:上海優(yōu)選生物 | 發(fā)布時(shí)間: 2025-05-30 | 39 次瀏覽 | 分享到:
川陳皮素主要是從蕓香科植物柑橘類(lèi)(如陳皮)中提取出來(lái)的一種黃酮類(lèi)的化合物,具有抗氧化,抗炎,保護(hù)心血管等生物活性?;瘜W(xué)式是C21H22O8,分子量為402.39,含多個(gè)甲氧基和羥基,決定其生物活性。廣泛應(yīng)用在醫(yī)藥研發(fā),食品加工等行業(yè)。川陳皮素微溶于水,而易溶于甲醇、乙醇、丙酮、醋酸、乙醚等有機(jī)溶劑。

川陳皮素主要是從蕓香科植物柑橘類(lèi)(如陳皮)中提取出來(lái)的一種黃酮類(lèi)的化合物,具有抗氧化,抗炎,保護(hù)心血管等生物活性。化學(xué)式是C21H22O8,分子量為402.39,含多個(gè)甲氧基和羥基,決定其生物活性。廣泛應(yīng)用在醫(yī)藥研發(fā),食品加工等行業(yè)。川陳皮素微溶于水,而易溶于甲醇、乙醇、丙酮、醋酸、乙醚等有機(jī)溶劑。


科研實(shí)驗(yàn)室常用的檢測(cè)方法是高效液相色譜(HPLC)或液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用(LC-MS)。


1.樣品處理


將樣品粉碎研磨,過(guò)24目篩,精密稱(chēng)量0.2g,放到具塞錐形瓶中,精密加入25mL的甲醇,一起稱(chēng)取重量后就開(kāi)始進(jìn)行超聲處理了。超聲波設(shè)置300W的功率,頻率調(diào)整為40kHz,超個(gè)45分鐘,放冷,再稱(chēng)量一次看看重量有沒(méi)有變少。如果真的變少了,就用甲醇來(lái)補(bǔ)足一下。這個(gè)時(shí)候,就是要微調(diào)的添加,不能加多了。然后就要搖勻,0.45um膜過(guò)濾一下,準(zhǔn)備檢測(cè)。



2.色譜條件


C18色譜柱,250mm長(zhǎng),4.6mm內(nèi)徑,5um粒徑,柱溫25℃;以乙腈和水為流動(dòng)相,梯度洗脫,流速1ml/min;紫外檢測(cè)器,波長(zhǎng)330nm,進(jìn)樣量5-10uL。



3.標(biāo)準(zhǔn)曲線


稱(chēng)取川陳皮素的對(duì)照品適量,加入甲醇配置成25ug/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液母液。再對(duì)它進(jìn)行成倍的稀釋?zhuān)纬?個(gè)逐漸降低的濃度點(diǎn)。確保濃度在檢測(cè)限的有效范圍,這樣測(cè)出來(lái)的數(shù)據(jù)才是準(zhǔn)確的。進(jìn)樣到HPLC,測(cè)出各個(gè)濃度點(diǎn)的色譜峰,記錄保留時(shí)間。對(duì)色譜峰進(jìn)行積分和它的標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度一起,就能擬合出標(biāo)準(zhǔn)曲線,得的回歸方程。其中,回歸方程的相關(guān)系數(shù)1>R>0.999。


4.含量計(jì)算


進(jìn)樣到HPLC中記錄色譜峰的情況,根據(jù)保留時(shí)間可以找到樣品的色譜峰,對(duì)這個(gè)色譜峰的面積積分,代入到回歸方程,就計(jì)算出樣品中的川陳皮素含量。


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