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黃芩素含量測定方法
來源: | 作者:上海優(yōu)選生物 | 發(fā)布時間: 2025-03-04 | 89 次瀏覽 | 分享到:
黃芩素,主要是存在于黃芩中而得名。它是黃芩的有效成分,是一種黃酮類化合物。化學式為C15H10O5,分子量為270.24,它是有3個環(huán)組成的,兩個苯環(huán)(A環(huán)和B環(huán))和一個含氧雜環(huán)(C環(huán))。在280-340 nm有強吸收。溶于甲醇,乙醇,丙酮,醋酸乙酯和熱冰醋酸,微溶于水。分子中含有多個羥基,具有抗菌,消炎,抗氧化,改善血液循環(huán),清除體內熱毒等作用。

黃芩素,主要是存在于黃芩中而得名。它是黃芩的有效成分,是一種黃酮類化合物。化學式為C15H10O5,分子量為270.24,它是有3個環(huán)組成的,兩個苯環(huán)(A環(huán)和B環(huán))和一個含氧雜環(huán)(C環(huán))。在280-340 nm有強吸收。溶于甲醇,乙醇,丙酮,醋酸乙酯和熱冰醋酸,微溶于水。分子中含有多個羥基,具有抗菌,消炎,抗氧化,改善血液循環(huán),清除體內熱毒等作用。



檢測樣品中的黃芩素含量,實驗室的方法有分光光度法,高效液相色譜(HPLC)法,液相色譜質譜聯(lián)用(LC-MS)法,薄層色譜(TLC)法等。這里以HPLC為例,簡單的介紹一下檢測過程,僅供參考。


1.樣品處理


如果是植物樣本,就可以打碎成粉末。精密稱取5mg,倒入25ml的容量瓶中,加入適量的甲醇,進行超聲溶解。冷卻到室溫的時候,用甲醇進行稀釋定容到刻度,搖勻。用0.45um的濾膜過濾,待測。



2.色譜條件


C18的色譜柱,250mm長,4.6mm內徑,粒徑5um,柱溫30-35℃;以甲醇-0.1%磷酸水溶液為流動相(梯度洗脫)或甲醇/乙腈-水,流速1.0ml/min;紫外檢測器,波長280nm;進樣量10-20ul。



3.標準曲線


在處理樣品的時候,也需要處理一下標準品。比如,稱量2mg的黃芩素,在10mg的容量瓶中,用甲醇超聲溶解,冷卻到室溫,定容即可。標準曲線,是由坐標軸上的5-7個點連接在一起形成的一條近似直線。那么,稀釋的第一個點比較重要,也是標曲的最低點。一般是選擇信噪比的5-10倍,獲得相對優(yōu)良的線性。依次,成倍的梯度稀釋。通過以上的色譜條件,測出對應的色譜峰。對色譜峰面積進行積分,對應標準溶液的濃度,繪制標曲,得到回歸方程,相關系數(shù)r2要大于0.999。


4.樣品測定


當有了標準曲線,就可以通過樣品的色譜峰面積,計算出樣品中的黃芩素含量。樣品測定的條件,要和標準品一樣的,避免造成誤差。同時,有的需要考慮回收率,重復性等。從而確保實驗結果的真實,可靠。


質譜法通過質譜檢測黃芩素的分子離子峰,內標或標準曲線的方法,計算出樣品中的黃芩素含量。


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