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莽草酸含量檢測方法
來源: | 作者:上海優(yōu)選生物 | 發(fā)布時(shí)間: 2025-02-08 | 135 次瀏覽 | 分享到:
莽草酸是從天然植物中提取出來的一種有機(jī)化合物,比如八角茴香,木質(zhì)素,植物油,動物油等。莽草酸的化學(xué)式為C7H10O5,分子量為174.15,微溶于乙醇、乙醚,不溶于氯仿和苯。莽草酸是一種重要的代謝產(chǎn)物,由植物體內(nèi)的糖代謝途徑合成。在細(xì)胞中,葡萄糖通過糖醇磷酸化途徑,轉(zhuǎn)化為磷酸葡萄糖,在進(jìn)一步的轉(zhuǎn)化為莽草酸。莽草酸在細(xì)胞質(zhì)中會被轉(zhuǎn)化為羥基苯丙酸,通過酶催化作用,將羥基苯丙酸還原為苯丙烷,參與植物細(xì)胞壁的合成。

莽草酸是從天然植物中提取出來的一種有機(jī)化合物,比如八角茴香,木質(zhì)素,植物油,動物油等。莽草酸的化學(xué)式為C7H10O5,分子量為174.15,微溶于乙醇、乙醚,不溶于氯仿和苯。莽草酸是一種重要的代謝產(chǎn)物,由植物體內(nèi)的糖代謝途徑合成。在細(xì)胞中,葡萄糖通過糖醇磷酸化途徑,轉(zhuǎn)化為磷酸葡萄糖,在進(jìn)一步的轉(zhuǎn)化為莽草酸。莽草酸在細(xì)胞質(zhì)中會被轉(zhuǎn)化為羥基苯丙酸,通過酶催化作用,將羥基苯丙酸還原為苯丙烷,參與植物細(xì)胞壁的合成。



莽草酸通過影響花生四烯酸代謝,來抑制血小板凝聚,從而到達(dá)抗炎、鎮(zhèn)痛的作用。莽草酸代謝途徑主要存在于植物、真菌和微生物中,該途徑經(jīng)歷了7個(gè)酶化過程。莽草酸也可以通過人工合成,用于藥理學(xué)、醫(yī)藥和化學(xué)品等行業(yè)。


一般采用高效液相色譜(HPLC)法測定,實(shí)驗(yàn)室也有用到其他方法,比如氣相色譜,分光光度法等。這里以HPLC為例,簡單的介紹一下檢測過程。


1.樣品制備:將植物樣品進(jìn)行粉碎成末,稱量1g,加入乙酸乙酯超聲提取30min,冷卻過夜,用乙酸乙酯定容。過濾,蒸干,再用甲酸溶解。也可以用甲醇進(jìn)行溶解,超聲提取,并定容待測。



2.色譜條件:采用C18的色譜柱,柱溫25-30℃;用甲醇-1%的磷酸溶液或乙腈-0.2%的磷酸溶液,流速1.0ml/min。紫外檢測器,波長215nm,進(jìn)樣量10ul。僅供參考,具體還要驗(yàn)證或參考相關(guān)的文獻(xiàn),獲得相對準(zhǔn)確的、可靠的檢測結(jié)果。


3.標(biāo)準(zhǔn)曲線:對莽草酸的標(biāo)準(zhǔn)品,使用有機(jī)溶劑,如磷酸二氫鉀溶液進(jìn)行梯度稀釋5-7個(gè)點(diǎn)。根據(jù)測出來的色譜峰面積,對應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)品溶液濃度,繪制出標(biāo)準(zhǔn)曲線,得到回歸方程,確保相關(guān)系數(shù)r2>0.999。在一定程度上,還需要考慮到重復(fù)性。如果重復(fù)性不滿足要求,測出來的數(shù)據(jù)偶然性就大了。



4.樣品測定和計(jì)算:使用和標(biāo)準(zhǔn)品相同的色譜條件,將測出來的色譜峰面積進(jìn)行積分。如果怕標(biāo)準(zhǔn)品污染了色譜柱,也可以先用樣品測,然后上標(biāo)準(zhǔn)品。計(jì)算的時(shí)候,就是根據(jù)樣品的色譜峰面積,和標(biāo)準(zhǔn)品的回歸方程,計(jì)算出莽草酸含量。這里,還需要考慮到樣品的稀釋倍數(shù),進(jìn)一步準(zhǔn)確計(jì)算出樣品中的莽草酸含量。


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