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脫落酸,是一種抑制生長(zhǎng)的植物激素。它能讓葉子落下來,就稱為脫落酸。在植物,特別是高等植物中都有存在。經(jīng)過科學(xué)研究證明,它除了能讓葉子脫落,還能使根芽進(jìn)入休眠狀態(tài)。因此,在種子儲(chǔ)藏的時(shí)候,有的地方會(huì)用脫落酸對(duì)種子進(jìn)行處理,抑制發(fā)芽,從而積累糖分和蛋白。脫落酸能夠讓植物,具有抗旱能力。周邊環(huán)境的水分減少了的時(shí)候,脫落酸讓葉片脫落下來,降低呼吸作用,從而減少水分的流失。如果給小麥?zhǔn)┘用撀渌?,就?huì)抑制桿的伸長(zhǎng),將果實(shí)保持的更堅(jiān)實(shí),從而提高麥粒的重量。這個(gè)小麥的桿子不那么高,底盤低,扎實(shí),就起到抗倒伏的作用。
氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(LC-MS),是測(cè)定植物脫落酸含量的一種常用方法,它具有高效,快捷,準(zhǔn)確,可靠的特點(diǎn)。在科研領(lǐng)域,GC-MS檢測(cè)結(jié)果,具有相對(duì)權(quán)威的參考價(jià)值。
GC-MS測(cè)植物脫落酸,過程包括樣品制備,衍生化處理,色譜分離,質(zhì)譜檢測(cè),結(jié)果分析等。
1.樣品處理
對(duì)植物的組織樣本進(jìn)行研磨成粉,并在甲酸等有機(jī)溶劑的作用下,提取出其中的脫落酸。這里,可能會(huì)用到超聲水浴等措施。總之,就是盡可能的利用現(xiàn)在通用的,科學(xué)的提取方法,將植物組織中的脫落酸,溶入待測(cè)溶液中,從而有利于后續(xù)的儀器分析。
2.衍生化
脫落酸本身是不易揮發(fā)的,需要給脫落酸扎上翅膀,讓它轉(zhuǎn)化成揮發(fā)性的化合物。一般情況下,可以用甲?;然瘜W(xué)反應(yīng),有利于GC更好的進(jìn)行分離。這個(gè)步驟是相對(duì)繁瑣的,如果有需求的話,需要查詢操作步驟和流程,掌握準(zhǔn)確的參數(shù)和條件,從而獲得相對(duì)可靠的檢測(cè)結(jié)果。
3.色譜分離
這里色譜是氣相,它是根據(jù)衍生化脫落酸的化學(xué)性質(zhì)進(jìn)行分離,選擇適當(dāng)?shù)臍庀嗌V柱,設(shè)置溫度。調(diào)整氣相色譜的載氣流速,升溫速率。這里沒有提到檢測(cè)器,因?yàn)樗锹?lián)用的質(zhì)譜。因此,這里的目的,就是將脫落酸從溶液中充分的分離出來。
4.質(zhì)譜檢測(cè)
從氣相色譜中洗脫出來的脫落酸,進(jìn)入到質(zhì)譜檢測(cè)器。先在離子源的地方,將化合物打碎。再進(jìn)入質(zhì)譜檢測(cè)器的真空環(huán)境中,電磁場(chǎng)的作用下,根據(jù)質(zhì)荷比(m/z)的不同,分離出對(duì)應(yīng)的質(zhì)譜峰。離子源的電離模式有多種,常用的是電子轟擊電離或化學(xué)電離。對(duì)分離出來的化合物,進(jìn)行質(zhì)譜掃描。對(duì)質(zhì)譜圖中的數(shù)據(jù),進(jìn)行必要的分析,結(jié)合已知脫落酸的基本特征,對(duì)脫落酸進(jìn)行定性分析。同時(shí),可以根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線的方法,計(jì)算出樣品中的脫落酸含量。