二十二碳六烯酸，簡稱為DHA，是人體所需的一種多不飽和脂肪酸。分子式為C22H32O2，分子量328.48。分子結構中含有22個碳原子和6個雙鍵的直鏈脂肪酸。在體內代謝的過程中，可由α-亞麻酸生成，主要是靠食物補充的。DHA輔助腦細胞發(fā)育，改善血液循環(huán)，抗衰老，降血脂等。提取的方法，包括尿素包合，超臨界流體萃取，己烷溶劑液液萃取，真菌發(fā)酵等。

檢測方法包括氣相色譜（GC）法、高效液相色譜（HPLC）法、液相質譜聯(lián)用（LC-MS）法、酶聯(lián)免疫吸附（ELISA）法等。

1.氣相色譜（GC）法

GC的流動相是氣體，通過樣品在色譜柱和流動相之間的分配系數(shù)差異，逐步將樣品中的化合物分離出來，通過檢測器讀取信號，在軟件中以色譜峰的形式記錄。通過內標或標準曲線的方式，計算出樣品中的DHA含量。常用于檢測血液，魚油，微藻等樣品中的DHA含量。

檢測包括樣品前處理，色譜條件設置，上機測定，標準曲線，結果計算等過程。

2.高效液相色譜（HPLC）法

前處理方法：將樣品用乙醇-水溶解，加入2%氫氧化鈉-甲醇溶液，水浴1.5h。通過液液萃取或固相萃取等方法去除雜質，使用旋蒸的方法將溶液濃縮，將濃縮后的樣品進行甲酯化處理，生成容易檢測到的酯類化合物。

色譜條件：

依然用C18的色譜柱，柱溫一般是室溫或25℃；流動相，通常情況下，使用甲醇/乙腈和水，流速為1.0ml/min；紫外檢測器，波長205nm或根據(jù)實際情況調整。進樣量一般會選擇10ul。

標準曲線：

使用標準品，進行成倍的，梯度稀釋，至少6個點。測定色譜峰，對峰面積進行積分處理。結合對應的標準溶液濃度，繪制標準曲線，得到回歸方程。

計算結果：

采用同樣的色譜條件，測定樣品的色譜峰。結合色譜峰面積的積分，標準曲線，可以計算出樣品中的DHA含量。

3.液相色譜-質譜聯(lián)用法（LC-MS）

結合液相色譜和質譜技術的優(yōu)點，能夠高效、精準地檢測DHA的含量變化。這種方法，適用于復雜化合物的樣品分析。

4.酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）

往預先包被二十二碳六烯酸（DHA）抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的二十二碳六烯酸（DHA）呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。