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藥代動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)是研究藥物在生物體內(nèi)的吸收、分布、代謝和排泄過(guò)程及其動(dòng)態(tài)變化規(guī)律的實(shí)驗(yàn)。
一、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與準(zhǔn)備
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物:通常選用小鼠等。不同的藥物研究可能根據(jù)其特性選擇不同的動(dòng)物模型。
實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:實(shí)驗(yàn)前動(dòng)物需要禁食一定時(shí)間(如10小時(shí))但不禁水。同時(shí),還應(yīng)準(zhǔn)確稱(chēng)量動(dòng)物體重。
二、給藥途徑與劑量
給藥途徑:包括口服、靜脈注射、肌肉注射、皮下注射等多種途徑。給藥途徑的選擇取決于藥物的劑型、性質(zhì)和研究目的。
給藥劑量:根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和動(dòng)物的體重來(lái)確定,確保給藥劑量在安全范圍內(nèi)且能產(chǎn)生明顯的藥理效應(yīng)。
三、血樣采集與處理
采血時(shí)間點(diǎn):在給藥后的不同時(shí)間點(diǎn)采集血液,以測(cè)定血藥濃度。這些時(shí)間點(diǎn)通常包括0分鐘、5分鐘、15分鐘、30分鐘、1小時(shí)、2小時(shí)、4小時(shí)、8小時(shí)等,具體時(shí)間點(diǎn)根據(jù)藥物的特性和實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)來(lái)確定。
采血方法:采血方法包括尾靜脈采血等。
樣品處理:將采集到的血液樣品靜置、離心,取血清后進(jìn)行冷凍保存。在采集完畢后進(jìn)行離心和分離血清,并加入肝素防止凝血。
四、藥物濃度測(cè)定與分析
測(cè)定方法:采用高效液相色譜法(HPLC)、液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)(LC-MS/MS)等方法測(cè)定樣品中的藥物濃度。
參數(shù)分析:計(jì)算血藥濃度-時(shí)間曲線下面積(AUC)、達(dá)峰時(shí)間(Tmax)、半衰期(T1/2)、清除率(CL)、表觀分布容積(Vd)、峰濃度(Cmax)、生物利用度(F)、生物等效性等
測(cè)定方法:
高效液相色譜(HPLC)或液質(zhì)聯(lián)用(LC-MS)法