信號(hào)分子是植物體內(nèi)的一些化學(xué)分子，它們的作用是在細(xì)胞內(nèi)或細(xì)胞間傳遞信息。一般情況下，將細(xì)胞外的信號(hào)分子稱(chēng)為“第一信使”，如植物激素等。在細(xì)胞內(nèi)傳導(dǎo)信號(hào)的稱(chēng)為“第二信使”，如cAMP，cGMP，IP3，Ca2+等。根據(jù)信號(hào)分子的溶解性，可分為親水性和親脂性。信號(hào)分子的主要特點(diǎn)是特異性，高效性，可被滅活。信號(hào)分子有很多種類(lèi)，包括蛋白質(zhì)，氨基酸衍生物，膽固醇，脂肪酸衍生物等。

檢測(cè)方法，主要包括化學(xué)分析、電化學(xué)等。

1.化學(xué)分析

首先，要從植物樣品中將信號(hào)分子提取出來(lái)。利用信號(hào)分子的化學(xué)性質(zhì)，比如非極性的信號(hào)分子，用正己烷，石油醚等溶劑；極性的信號(hào)分子，用乙酸乙酯，醇等溶劑。分離的方法有氣相色譜，液相色譜，電泳，質(zhì)譜等。根據(jù)信號(hào)分子的物理性質(zhì)，比如分配系數(shù)，吸附，滲透等能力不同而分離。電泳方法，也可以根據(jù)電荷和分子量進(jìn)行分離。LC-MS可以對(duì)化合物進(jìn)行更準(zhǔn)確的檢測(cè)，確定其化學(xué)結(jié)構(gòu)和分子量。

例如，HPLC測(cè)信號(hào)分子含量。樣品制備包括研磨、提取、離心等步驟。色譜條件包括，常用的C18反相色譜柱，柱溫在25-35℃。以乙腈，甲醇和水為流動(dòng)相，有的還會(huì)添加緩沖液，比如乙腈和水，并加入一定的冰醋酸，流速為1.0ml/min。紫外檢測(cè)器，波長(zhǎng)根據(jù)化合物的性質(zhì)，選擇比較適合目標(biāo)物質(zhì)的吸收波長(zhǎng)。

2.電化學(xué)

電化學(xué)方法是基于電化學(xué)反應(yīng)的檢測(cè)技術(shù)，通過(guò)測(cè)量電化學(xué)反應(yīng)過(guò)程中產(chǎn)生的電位變化，來(lái)檢測(cè)信號(hào)分子。當(dāng)植物內(nèi)發(fā)生氧化還原反應(yīng)，信號(hào)分子會(huì)攜帶電荷，忙碌著傳遞信號(hào)。測(cè)定反應(yīng)過(guò)程中的電流變化，可以測(cè)定中信號(hào)的濃度。當(dāng)植物受到脅迫的時(shí)候，會(huì)有過(guò)氧化氫，一氧化氮的變化，通過(guò)電極傳感器來(lái)測(cè)定含量。

3.電泳法

SDS是一種陰離子去污劑，能夠?qū)⒎肿觾?nèi)或分子間的氫鍵斷裂，使分子折疊起來(lái)，破壞蛋白質(zhì)分子的二級(jí)，三級(jí)結(jié)構(gòu)。還原劑如β-巰基乙醇，能夠讓半胱氨酸殘基之間的二硫鍵斷裂。在樣品加入SDS和還原劑，樣品中的蛋白質(zhì)分子的氫鍵和二硫鍵發(fā)生斷裂，蛋白質(zhì)的氨基酸側(cè)鏈會(huì)和SDS結(jié)合，形成帶負(fù)電的蛋白質(zhì)-SDS膠束。這個(gè)結(jié)合體所帶電荷就比蛋白質(zhì)原有的電荷量大，消除了蛋白質(zhì)的自身的電荷影響，就看分子量大小。利用電泳的方法，根據(jù)梯度的標(biāo)準(zhǔn)分子量蛋白的遷移率，能夠分離出來(lái)，結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算出樣品中蛋白分子量。

操作步驟，包括分離膠制備，樣品制備，點(diǎn)樣，電泳，固定，染色，脫色等。