硬脂酸屬于長鏈飽和脂肪酸，是37種脂肪酸中的一種。在長鏈飽和脂肪酸中，主要有肉豆蔻酸，棕櫚酸，硬脂酸和花生酸。硬脂酸的化學(xué)式為C??H??O?，廣泛存在動物脂肪和某些植物油中，應(yīng)用于食品、化妝品、藥物、塑料和橡膠工業(yè)以及蠟燭制造等領(lǐng)域。硬脂酸在化學(xué)上相對穩(wěn)定，不易被氧化。不溶于水，稍溶于冷乙醇，加熱時較易溶解。微溶于丙酮、苯，易溶于乙醚、氯仿、熱乙醇等。

檢測方法：氣相色譜（GC）或氣相質(zhì)譜聯(lián)用

1.樣品皂化

精確稱取0.005g樣品，倒入15mL透明離心管，加入5mL 正己烷、3mL CH3OH-KOH(0.5mol/L)混勻，60℃烘箱中甲酯化30min，取出4000r/min 離心 10min，取全部上清，過 0.22μm 濾膜，待測。

2.色譜條件

可用DB-23的色譜柱，30mx0.25mmx0.25um，程序升溫，初始50℃保持1min，以25℃/min升到175℃保持0min，以4℃/min升到230℃保持10min。流速為1.3ml/min，氮?dú)夂蜌錃獾牧髁繛?0ml/min，空氣流量為300ml/min，分離比5:1。采用FID檢測器，檢測器溫度250℃，進(jìn)樣口溫度250℃，進(jìn)樣量1uL。

3.標(biāo)準(zhǔn)曲線

配制硬脂酸的標(biāo)準(zhǔn)母液，并進(jìn)行適當(dāng)?shù)奶荻认♂?，覆蓋到樣本溶液可能的范圍。需要考慮到檢測限，稀釋倍數(shù)等。一般是5-7個濃度點(diǎn)，依次進(jìn)樣到HPLC中，測定標(biāo)準(zhǔn)溶液的各個濃度點(diǎn)的色譜峰。記錄各個標(biāo)準(zhǔn)峰的保留時間，對各個峰的面積進(jìn)行積分，擬合出標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到回歸方程。

4.樣品測定

將樣品溶液進(jìn)樣到HPLC中，根據(jù)保留時間找到樣品的硬脂酸的色譜峰。對峰面積進(jìn)行積分，并代入到回歸方程，計算出進(jìn)樣到HPLC的樣本溶液中硬脂酸的含量。