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齊墩果酸含量測定方法
來源: | 作者:上海優(yōu)選生物 | 發(fā)布時(shí)間: 2025-05-14 | 43 次瀏覽 | 分享到:
齊墩果酸是五環(huán)三萜類化合物,主要來源于女貞子、青葉膽、夏枯草、連翹、山茱萸等傳統(tǒng)中藥材,具有廣泛的藥理活性,比如降血糖,保護(hù)肝臟等。化學(xué)式為C30H48O3,分子量為456.7,不溶于水,但溶于甲醇,乙醇,乙醚,丙酮和氯仿等。它屬于齊墩果烷型,結(jié)構(gòu)中包含了5個(gè)環(huán)狀骨架和3個(gè)異戊二烯側(cè)鏈。

齊墩果酸是五環(huán)三萜類化合物,主要來源于女貞子、青葉膽、夏枯草、連翹、山茱萸等傳統(tǒng)中藥材,具有廣泛的藥理活性,比如降血糖,保護(hù)肝臟等?;瘜W(xué)式為C30H48O3,分子量為456.7,不溶于水,但溶于甲醇,乙醇,乙醚,丙酮和氯仿等。它屬于齊墩果烷型,結(jié)構(gòu)中包含了5個(gè)環(huán)狀骨架和3個(gè)異戊二烯側(cè)鏈。



檢測樣本中的齊墩果酸含量的方法主要包括高效液相色譜(HPLC)和液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用(LC-MS)法,另外也有薄層色譜法。這里以HPLC為例簡單的介紹一下測定含量的過程,僅供參考。


1.樣品處理


將植物樣進(jìn)行粉碎處理并過40目篩,精密稱量1.0g的粉末樣本加入25ml的甲醇溶解。超聲波(300-400W,40Hz)提取30min冷卻后用甲醇補(bǔ)足失去的重量,過濾后待測。



2.色譜條件


C18的反相色譜柱,250mmx4.6mm,5um,柱溫30℃左右;流動(dòng)相以甲醇和0.2%磷酸水(85:15),流速為1ml/min;紫外檢測器,波長210nm;進(jìn)樣量10-20uL。



3.標(biāo)準(zhǔn)曲線


精密稱取齊墩果酸的標(biāo)準(zhǔn)品用甲醇溶解并定容,梯度稀釋5-7個(gè)濃度點(diǎn)在檢測器的有效范圍內(nèi)。以上述的色譜方法為條件進(jìn)樣到HPLC中測出來各個(gè)標(biāo)準(zhǔn)溶液的色譜峰圖,并記錄色譜峰的保留時(shí)間和峰面積。對色譜峰面積進(jìn)行積分并結(jié)合它對應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度繪制出標(biāo)準(zhǔn)曲線并得到回歸方程,相關(guān)系數(shù)r2需要大于0.999以滿足正常的計(jì)算需求。在必要的時(shí)候還需要考慮到方法學(xué)比如精密度、穩(wěn)定性、加標(biāo)回收率等。


4.含量計(jì)算


樣品測定的方法是和標(biāo)準(zhǔn)品相似的依據(jù)的是獲得的最佳的色譜條件,根據(jù)測出來的色譜峰看它的保留時(shí)間就能識別出齊墩果酸的樣品色譜峰。找到了這個(gè)樣品峰后對它進(jìn)行手動(dòng)或自動(dòng)的積分處理并帶入到回歸方程就能得到齊墩果酸的含量。


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