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植物有機(jī)硒是硒元素和植物中有效成分的結(jié)合物,從食物鏈的角度來(lái)看,它直接影響到了人體的硒營(yíng)養(yǎng)狀況。有機(jī)硒主要是以硒代氨基酸和硒蛋白的形式存在。植物有機(jī)硒,它還有一個(gè)名字就是硒代氨基酸。硒代氨基酸主要包括硒代胱氨酸,硒代半胱氨酸,甲基-硒代半胱氨酸,硒代蛋氨酸。硒代氨基酸有啥用處呢?它能夠直接提供抗氧化劑,合成能夠抗氧化的蛋白質(zhì)。具有抗衰老,促進(jìn)免疫的作用。
檢測(cè)植物中的硒代氨基酸的方法,可用高效液相色譜(HPLC)法,液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(LC-MS)法,氣相色譜(GC)法,毛細(xì)電泳法等。
1.高效液相色譜(HPLC)法
為什么可以用HPLC測(cè)硒代氨基酸呢?其實(shí),HPLC只是檢測(cè)過(guò)程中的一個(gè)部分。是這樣的,需要對(duì)植物樣品進(jìn)行預(yù)處理,將硒代氨基酸從分離出來(lái),進(jìn)樣,通過(guò)HPLC的色譜柱分離。最后,到ICP-MS中測(cè)定出來(lái)硒元素的含量。這種方法準(zhǔn)確度高,但需要注意預(yù)處理的方法,確保硒代氨基酸的有效提取出來(lái)。對(duì)于定量來(lái)說(shuō),一般也是采用標(biāo)準(zhǔn)曲線的方法,計(jì)算出樣品中的硒代氨基酸含量。這個(gè)方法是將硒代氨基酸中的硒全部計(jì)算進(jìn)去的,所以核心就在于對(duì)硒代氨基酸的提取。
2.氣相色譜(GC)法
氣相色譜主要是測(cè)揮發(fā)性的成分,可以將硒代氨基酸進(jìn)行衍生化,形成揮發(fā)性的有機(jī)物。衍生化有硅烷化,甲基化等,對(duì)樣品進(jìn)行預(yù)處理,轉(zhuǎn)化成可以被氣相色譜有效檢測(cè)到的物質(zhì),進(jìn)樣并測(cè)定出來(lái)色譜峰,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線,計(jì)算出對(duì)應(yīng)的含量。如果為了更準(zhǔn)確的檢測(cè),還可以和質(zhì)譜檢測(cè)器聯(lián)合使用,從質(zhì)荷比(m/z)的角度來(lái)對(duì)硒代氨基酸進(jìn)行定量。
3.液相色譜-質(zhì)譜(LC-MS)法
就是將硒代氨基酸,從樣品中提出來(lái)之后,在液相色譜中進(jìn)行分離。分離后的化合物,進(jìn)入到質(zhì)譜中,氣化成離子。通過(guò)質(zhì)譜峰和數(shù)據(jù),對(duì)硒代氨基酸進(jìn)行定性和定量分析。