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圣草酚含量測定方法
來源: | 作者:上海優(yōu)選生物 | 發(fā)布時(shí)間: 2025-02-12 | 203 次瀏覽 | 分享到:
圣草酚主要存在于植物圣草中,其他植物也有,比如薔薇科,唇形科,菊科等植物中,在檸檬,花生及花生殼中也有發(fā)現(xiàn)。當(dāng)然,圣草酚也可以通過人工的方式合成。圣草酚是一種黃酮類化合物,其B環(huán)上有鄰二酚羥基,這使得圣草酚具有強(qiáng)大的抗氧化活性?;瘜W(xué)式為C15H12O6,分子量為288.25,易溶于甲醇,略微溶于沸水、熱乙醇、乙醚及冰醋酸。為什么要研究圣草酚呢,它具有多種藥理活性,包括抗氧化,抗炎,鎮(zhèn)痛等。同時(shí),在食品和飲料行業(yè),也被當(dāng)做抗氧化劑使用。

圣草酚主要存在于植物圣草中,其他植物也有,比如薔薇科,唇形科,菊科等植物中,在檸檬,花生及花生殼中也有發(fā)現(xiàn)。當(dāng)然,圣草酚也可以通過人工的方式合成。圣草酚是一種黃酮類化合物,其B環(huán)上有鄰二酚羥基,這使得圣草酚具有強(qiáng)大的抗氧化活性?;瘜W(xué)式為C15H12O6,分子量為288.25,易溶于甲醇,略微溶于沸水、熱乙醇、乙醚及冰醋酸。為什么要研究圣草酚呢,它具有多種藥理活性,包括抗氧化,抗炎,鎮(zhèn)痛等。同時(shí),在食品和飲料行業(yè),也被當(dāng)做抗氧化劑使用。



檢測植物樣品中的圣草酚含量,實(shí)驗(yàn)室一般會(huì)采用是高效液相色譜(HPLC)法。


1.樣品提取


將新鮮的植物樣本進(jìn)行風(fēng)干粉碎,之前說過,它能夠溶于甲醇等有機(jī)溶劑。因此,用適當(dāng)?shù)挠袡C(jī)溶劑來浸泡,讓樣本中的圣草酚能夠盡可能的溶出來,抽濾濃縮,待測。



2.色譜條件


采用C18的色譜柱,長度250mm,內(nèi)徑4.6mm,粒徑5um,柱溫25℃。那有人會(huì)問,柱溫為什么要設(shè)置25℃。其實(shí),這是之前的經(jīng)驗(yàn)。如果自己要測的話,還是要進(jìn)行驗(yàn)證的。如果測出來的色譜峰不理想,還是需要調(diào)整的,并不是一成不變的。使用甲醇-乙腈-水為流動(dòng)相,具體的配比是有的,在做實(shí)驗(yàn)的時(shí)候,可以參考成功的文獻(xiàn)資料。不同的機(jī)器設(shè)備,規(guī)格,使用的有機(jī)溶劑不同,比例也會(huì)有很多差別的。流速一般為1ml/min,是可以隨時(shí)調(diào)整的。紫外檢測器,波長254nm,僅供參考。那么,進(jìn)樣量是多少呢?一般會(huì)選擇10-20ul,有手動(dòng)進(jìn)樣,也有自動(dòng)進(jìn)樣,根據(jù)出峰的情況調(diào)整。



3.標(biāo)準(zhǔn)曲線


標(biāo)準(zhǔn)曲線是外標(biāo)法,將標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行梯度、成倍的稀釋,5-7個(gè)濃度點(diǎn),有機(jī)溶劑或流動(dòng)相進(jìn)行定容。以上述的色譜條件,上機(jī)測定,出峰。對(duì)目標(biāo)色譜峰的峰面積進(jìn)行積分,對(duì)應(yīng)峰的標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度,在坐標(biāo)軸上描點(diǎn),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。這個(gè)過程,可以通過辦公軟件完成?;貧w方程的相關(guān)系數(shù)r2>0.999,需要考慮重復(fù)性,回收率等。


4.樣品測定


樣品提取過程要符合要求,并按操作規(guī)程完成。這樣,才能更客觀的獲得相對(duì)準(zhǔn)確的含量。色譜的條件和標(biāo)準(zhǔn)品一樣的,能夠知道目標(biāo)峰,對(duì)峰面積進(jìn)行積分,代入回歸方程,計(jì)算出樣品中的圣草酚含量。


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