番瀉苷是從豆科植物番瀉中提取出來的一種天然蒽醌類有機(jī)物，常見的成分包括番瀉苷A和番瀉苷B，一般需要經(jīng)過腸道細(xì)菌的分解后才能轉(zhuǎn)化為活性物質(zhì)。番瀉苷A和B的化學(xué)式都是C42H38O20，分子量方面有一點(diǎn)點(diǎn)的差別。如番瀉苷A的分子量是862.74，而番瀉苷B的分子量是863.74，差1個(gè)質(zhì)量單位。番瀉苷A不溶于水、苯、醚和氯仿；微溶于甲醇、丙酮和二氧六環(huán)；溶于碳酸氫鈉水溶液。番瀉苷B不溶于水，微溶于甲醇和二甲基亞砜（DMSO），溶于二氧六環(huán)和甲醇。在科研角度來說，它可以刺激腸道神經(jīng)，增強(qiáng)腸道蠕動(dòng)，并抑制水分吸收。

檢測(cè)方法：高效液相色譜（HPLC），液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用（LC-MS）等。以番瀉苷A為例，簡(jiǎn)單介紹一下HPLC測(cè)定的過程。

1.樣品處理

將干燥的植物樣本進(jìn)行粉碎過篩處理，精密稱量0.5g，放入具塞錐形瓶中，加入50%的甲醇30ml，超聲30min，冷卻后用50%甲醇補(bǔ)充足失去的重量。過濾，精確量取10ml到25ml容量瓶中，用50%甲醇定容，0.45um膜過濾，待測(cè)。處理的方法，不是固定不變的，根據(jù)樣本的實(shí)際情況或環(huán)境進(jìn)行調(diào)整。

2.色譜條件

C18的色譜柱，250mm長，4.6mm內(nèi)徑，5um粒徑；柱溫25℃。以甲醇和0.5%磷酸溶液為流動(dòng)相，等度洗脫，或乙腈-水-冰醋酸等度洗脫，流速1ml/min。紫外檢測(cè)器，波長340nm，進(jìn)樣量10uL。理論塔板數(shù)不低于3000，僅供參考。

3.標(biāo)準(zhǔn)曲線

稱取番瀉苷A的標(biāo)準(zhǔn)品適量，使用50%甲醇溶解配制成1mg/mL的溶液。并進(jìn)行梯度稀釋成6個(gè)不同的濃度點(diǎn)，最低點(diǎn)和最高點(diǎn)要在檢測(cè)器有效范圍內(nèi)，確保檢測(cè)限。HPLC進(jìn)樣測(cè)出各個(gè)濃度的色譜峰，記錄色譜峰的位置，并對(duì)色譜峰面積進(jìn)行積分。對(duì)應(yīng)它的標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度，可以在表格中繪制出標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到回歸方程，相關(guān)系數(shù)r2＞0.999。在必要的時(shí)候，計(jì)算重復(fù)性，精密度，加標(biāo)回收率等。

4.樣品測(cè)定和含量計(jì)算

將制備好的樣品溶液，進(jìn)樣到HPLC，以和標(biāo)準(zhǔn)品相同的色譜條件，在軟件中記錄色譜峰。通過保留時(shí)間可以識(shí)別出目標(biāo)的色譜峰，并對(duì)它的面積進(jìn)行手工或自動(dòng)積分。代入到回歸方程，可以計(jì)算出番瀉苷A含量。