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乙醇酸是從一些水果中提取,如檸檬、甘蔗、蘋(píng)果等?;瘜W(xué)式為C2H4O3,分子量為76.05,溶于水,溶于甲醇、乙醇、乙酸乙酯等有機(jī)溶劑,不溶于烴類(lèi)。乙醇酸含有一個(gè)羧基和一個(gè)羥基,具有羧酸和醇的雙重性質(zhì),既能是生成酸鹽,也能生成酯。乙醇酸用于日用化工,電鍍和表面處理,化學(xué)清洗,生物降解材料的合成,工業(yè)殺菌等領(lǐng)域。
檢測(cè)樣品中的乙醇酸含量,實(shí)驗(yàn)室一般會(huì)用到高效液相色譜(HPLC),氣相色譜(GC),液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用(LC-MS),酸堿滴定等方法。這里,著重用HPLC來(lái)介紹一下乙醇酸含量的測(cè)定方法。
1.樣品處理
固體的樣品,就需要粉碎成末,稱(chēng)取1g放入到50ml容量瓶中,加入45ml的乙酸乙酯,超聲30min,靜置過(guò)夜,用乙酸乙酯定容。過(guò)濾,取25ml出來(lái)蒸干。再用甲酸溶解,定容到10ml,待測(cè)。
2.色譜條件
采用常規(guī)的C18色譜柱,250mm長(zhǎng),4.6mm內(nèi)徑,5um粒徑,柱溫30-35℃;用0.1 mol/L (NH4)2HPO4(pH值為2.4)溶液和乙腈為流動(dòng)相,等度洗脫,流速為1ml/min。紫外檢測(cè)器,波長(zhǎng)214nm,進(jìn)樣量10uL,僅供參考。需要根據(jù)實(shí)際情況,判斷和選擇。
3.標(biāo)準(zhǔn)曲線
取20mg的標(biāo)準(zhǔn)品,溶解并稀釋成6個(gè)梯度的標(biāo)準(zhǔn)溶液。在理想的色譜條件下,分別進(jìn)樣到HPLC中,對(duì)峰進(jìn)行標(biāo)記。其實(shí),有特征的就是出峰時(shí)間。對(duì)各個(gè)色譜峰的峰面積進(jìn)行手動(dòng)或自動(dòng)的積分處理,在表格中用函數(shù)對(duì)應(yīng)各個(gè)濃度,繪制出標(biāo)準(zhǔn)曲線圖,上面可以得到回歸方程。需要注意的是相關(guān)系數(shù)r2需要大于0.999,在有的地方需要對(duì)方法學(xué)進(jìn)行驗(yàn)證,如重復(fù)性,精密度,加標(biāo)回收率,檢測(cè)限,定量限等。
4.樣品測(cè)定
測(cè)定過(guò)程是相似的,色譜條件是相同的,對(duì)獲得的色譜峰進(jìn)行面積積分。代入到回歸方程,就能得到乙醇酸的含量。