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LC-MS/MS測定蘆筍皂苷含量
來源: | 作者:上海優(yōu)選生物 | 發(fā)布時間: 2025-01-17 | 249 次瀏覽 | 分享到:
色譜條件:C18柱,柱溫:40 °C,流速:0.3mL/min,流動相組成:A-0.1%甲酸水,B-乙腈。

使用液相串聯(lián)質(zhì)譜(LC-MS/MS)的方法測定皂苷的含量,在實驗室科研檢測過程中,需要掌握過硬的技術(shù),對方法和設備要非常熟悉。了解皂苷的物理和化學性質(zhì),可以在處理樣品的時候,更有效的提取處理,并不影響到皂苷的種類及含量。還需要了解皂苷的結(jié)構(gòu)和峰的特征,在質(zhì)譜峰的識別和定量計算的時候,要知道哪個是標準峰,哪個是樣品峰。參考之前的方法,有時候根據(jù)樣品的不同,需要進行驗證。



蘆筍中的皂苷具有多種的生物活性,在植物中的分布很廣,特別是中藥材中。它主要是由皂苷配基和糖,糖醛酸或其他有機酸組合而成的。皂苷的種類,按配基結(jié)構(gòu)來說,有甾族皂苷,三萜皂苷。


檢測皂苷含量,一般采用液相質(zhì)譜聯(lián)用(LC-MS/MS)法。


樣品處理:為了能夠更有效的提取出蘆筍中的皂苷,主要采用溶劑提取和超聲波提取。樣品粉碎均勻,過 60 目篩,精確稱取混勻樣品 0.1g左右于20ml棕色離心管中,然后加入10ml 甲醇水提取液(9:1),振蕩混勻 1min。密封后在 60℃水浴中超聲振蕩提取結(jié)束后,轉(zhuǎn)移上清液于 20ml 棕色離心管。重復提取一次,合并兩次提取液,用甲醇定容至 20ml,振蕩混勻,取適量上清液稀釋 10 倍后上機測定。



色譜條件:C18柱,柱溫:40 °C,流速:0.3mL/min,流動相組成:A-0.1%甲酸水,B-乙腈。


質(zhì)譜條件:氣簾氣35 arb,碰撞氣7arb,離子噴霧電壓-4500V,正離子模式 ESI- 離子源溫度450 °C,離子源氣體40a,離子源氣體50 arb。



標準曲線,將處理后得到的待測液,上機檢測,根據(jù)質(zhì)控實驗來確認目標峰保留位置,得到峰面積數(shù)據(jù),根據(jù)標準曲線及樣品稀釋倍數(shù),計算實際樣品中的含量。


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