乙酰輔酶a，簡寫為CoA。它是輔酶A的乙?；问?，或者活化了的乙酸。它是脂肪酸β氧化，以及糖酵解后產(chǎn)生的丙酮酸氧化脫羧的產(chǎn)物。在很多的代謝過程中，CoA都起著比較關(guān)鍵的作用。糖類，脂肪，蛋白質(zhì)徹底氧化，都會產(chǎn)生CoA，之后進入到三羧酸循環(huán)和氧化磷酸化，最終生成二氧化碳和水，釋放出能量用于ATP的合成。CoA是合成脂肪酸、酮體、膽固醇及衍生物的前體物質(zhì)。

檢測方法包括高效液相色譜（HPLC）法、質(zhì)譜（MS）法、酶聯(lián)免疫吸附（ELISA）法等。

1.HPLC

獲取新鮮的植物樣本，用液氮冷凍后，加入聚乙烯聚吡咯烷酮，去除多酚，防止樣品氧化。接著，研磨成粉末狀。稱量，加入純水，振蕩混勻，離心，取上清液，過0.22um濾膜，待測。具體步驟，可以參考相關(guān)的檢測方法。

色譜條件：C18的色譜柱，設(shè)置35-40℃的柱溫；以甲酸銨和乙腈為流動相（等度洗脫），0.5-1ml/min，紫外檢測器，進樣量10-20uL。

標(biāo)準(zhǔn)曲線：標(biāo)曲是一種外標(biāo)法，目前在科研檢測過程中使用較為普遍，它能更準(zhǔn)確的計算出樣品中的CoA的含量。采用5-7個點，讓它們在檢測器優(yōu)良的檢出限范圍內(nèi)。以色譜峰的積分面積為縱坐標(biāo)，對應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為橫坐標(biāo)，可以繪制出標(biāo)準(zhǔn)曲線?；貧w方程的相關(guān)系數(shù)r2＞0.999，近似于直線。它就像一把尺子，尺子做好了，就要測量樣品了。

樣品測定：將處理好的樣品，根據(jù)摸索出來的較好的色譜條件，和標(biāo)準(zhǔn)品相同的方法，測出色譜峰。對峰面積進行積分，結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程，可以計算出乙酰輔酶a的含量。這里需要注意的是要考慮稀釋倍數(shù)，回收率，重復(fù)性等要素。

2.質(zhì)譜法

一般是串聯(lián)了液相色譜，即LC-MS的形式測定。需要設(shè)置電離源模式，比如ESI，正離子模式，氮氣，霧化氣壓力，ESI的電壓，干燥氣的溫度和流速，監(jiān)測模式如多反應(yīng)監(jiān)測（MRM）等，根據(jù)測定出來的質(zhì)譜峰，確定目標(biāo)化合物。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線，可以更準(zhǔn)確的計算出樣品中的乙酰輔酶A的含量。

3.酶聯(lián)免疫吸附（ELISA）法

往預(yù)先包被乙酰輔酶a的微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的乙酰輔酶a呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。具體操作步驟，參考相關(guān)的檢測說明書。